FISH技術(shù)介紹及熒光顯微鏡應用

熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是應用熒光染料標記探針DNA，以熒光標記取代同位素標記組織、細胞核或染色體DNA進(jìn)行雜交的一種研究DNA序列在染色體上位置的新的原位雜交方法，常被稱(chēng)為是生命科學(xué)的“釣魚(yú)”技術(shù)。利用這一技術(shù)可對待測核酸定性、定位或相對定量的分析。

傳統的原位雜交方法是將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交后采用放射自顯影進(jìn)行檢測，這種檢測限制了雜交技術(shù)的廣泛應用，20世紀末由于人類(lèi)基因組計劃的啟動(dòng)，FISH技術(shù)得到了迅速的發(fā)展和廣泛的應用。

FISH技術(shù)是一種非放射性原位雜交技術(shù)，結合了生物學(xué)和細胞遺傳學(xué)，將真核生物細胞的染色體區帶與特定DNA片段聯(lián)系起來(lái)的一種快速而直接的檢測手段，廣泛應用于生物學(xué)研究中，可作為免疫組化表達初步篩查的首選方法，提高了基因定位的準確性。

利用DNA堿基對的互補性，將直接標記了熒光的單鏈DNA(探針)和與其互補的目標樣本的DNA(玻片上的標本)雜交，通過(guò)觀(guān)察熒光信號在染色體上的位置反映相應染色體的情況。

通過(guò)熒光顯微鏡觀(guān)察雜交信號。FISH在熒光顯微鏡下可以確認出腫瘤所在的位置。

因其安全性高、特異性好、快速準確，可以同時(shí)檢測多種序列、使用周期長(cháng)，在基因定位、染色體結構分析與數目測定、人類(lèi)產(chǎn)前診斷、病毒感染分析、腫瘤遺傳學(xué)等方面都發(fā)揮了不容小覷的作用。 今后在研究細胞核骨架與基因表達的關(guān)系、基因擴增，基因組結構與哺乳動(dòng)物的染色體調控等領(lǐng)域將會(huì )起到積極的作用。