先來(lái)了解一下尼康落射熒光顯微鏡Optiphot-2 結構圖片：

步驟一：熒光觀(guān)察及開(kāi)機

• 開(kāi)啟熒光電源，此時(shí)綠燈會(huì )亮起，一定要持續壓著(zhù)激發(fā)鈕約5 - 10秒待橘燈亮起后或是閃爍后橘燈熄，才可放手。若是燈無(wú)法亮起，請關(guān)電源重新打開(kāi)綠燈，一定要持續壓著(zhù)激發(fā)鈕約5 秒以上待橘燈亮起后，才可放手。等待約10秒橘燈再亮起，燈源才會(huì )穩定，但此時(shí)熒光汞燈尚未完全氣化, 要等待約10分鐘后可開(kāi)始使用。

• 將明視野鹵素燈源關(guān)到最小，依據所使用之熒光染劑將相符之熒光濾片轉至定位，確定shutter切到O之位置即可觀(guān)察。

• 熒光燈源開(kāi)機后至少使用30分鐘，關(guān)機后距離下次開(kāi)機時(shí)間最少須間隔30分鐘。

• 使用熒光UV 濾片要注意亮度,若示燈源太強,請使用ND濾片

步驟二：顯微鏡主機操作

• 打開(kāi)燈源，置上標本，調整亮度。

• 先以4X觀(guān)察（此時(shí)聚光鏡要旋出），轉粗調對焦，10X以上之物鏡不可將聚光鏡旋出。

• 調整瞳孔距離。

• 視差調整：閉左眼調右邊，閉右眼調左邊。

• 聚光鏡光圈切至物鏡NA值70﹪~80﹪位置。

• 聚光鏡調整至最高位置。

• 光軸校正之步驟：（搬動(dòng)顯微鏡才需做）：

1.先以10倍對焦標本。

2.將視野光圈關(guān)至最小。

3.升降聚光鏡至八角形最清楚。

4.視野光圈放大至接近視野。

5.若八角形不在中心，則旋轉聚光鏡位置調鈕至最中心。

6.再將光圈稍放大比視野大即可。

• 物鏡切換由低倍漸至高倍，4x、10x可以用粗調節輪調整，40x、100x只能以細調節輪做微調調整，如此才能避免物鏡與玻片磨損造成刮傷。

• 40x 物鏡上有一圈校正環(huán)，可旋轉，調整影像清晰度。

• 100倍物鏡為油鏡，使用時(shí)需滴鏡油，用完后須以拭鏡紙沾95﹪以上酒精多次擦拭才能干凈。

• 若玻片有滴油，請勿以40倍物鏡觀(guān)察，以免鏡油沾到影響觀(guān)察；若沾到油，則以拭鏡紙沾95﹪以上酒精多次擦拭干凈即可。

步驟三：圖像提取

• 將需提取的圖像置于視野正中央，將目鏡筒以順時(shí)針?lè )较蜣D90度，將影像切換至相機。

• 在電腦打開(kāi)ACT-1軟件，提取圖像。

• 此外可以參閱ACT-1 軟件使用手冊。